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免疫熒光技術的實驗步驟：
一、準備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其完全覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。

英文名稱   Anti-phospho-RAD9(Ser277)
中文名稱  磷酸化細胞周期檢查控制蛋白質抗體
濃    度  1mg/1ml 
規(guī) 格  0.1ml/100μg
抗體來源  Rabbit
克隆類型  polyclonal 
交叉反應   Mouse 
產品類型     一抗 磷酸化抗體
別    名  RAD9A(phospho S277); Cell cycle checkpoint control protein; Cell cycle checkpoint control protein RAD9A; DNA repair exonuclease rad9 homolog A; hRAD 9; hRAD9; Rad 9; RAD 9A; RAD9 (S pombe) homolog; RAD9 homolog A; RAD9 homolog; RAD9A; RAD9A_HUMAN.
研究領域   細胞生物 免疫學 染色質和核信號 信號轉導 細胞凋亡 細胞周期蛋白 轉錄調節(jié)因子
蛋白分子量   predicted molecular weight: 43kDa
性    狀  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from mouse RAD9 around the phosphorylation site of Ser277 [LC(p-S)PK]
亞    型  IgG 
純化方法  affinity purified by Protein A 
儲 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1%
產品應用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

抗體制備過程：

1.材料與試劑
  a．提取的動物 Ig
  b．弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
  c．青霉素和鏈霉素
  d．實驗動物 兔
  e．其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實驗活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）

抗原準備：
經常使用的抗原有：偶聯多肽、偶聯的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。
對可溶性抗原而言，為了增強其免疫原性或改變免疫反應的類型、節(jié)約抗原等目的，通常采用加佐劑的方法以刺激機體產生較強的免疫應答。
多克隆抗體和單克隆抗體的區(qū)別：
由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體。而同一種抗原決定簇，在機體內也可以由好幾種克隆來產生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。多克隆抗體是由異源抗原（大分子抗原、半抗原偶聯物）刺激機體產生免疫反應，有機體漿細胞分泌的一組免疫球蛋白。
效價測定：采用瓊脂擴散法。
⑴ 將血清倍比稀釋，加入外周孔。
⑵ 中間孔加動物 Ig。
⑶ 37℃濕盒瓊擴24 小時后觀察結果。 

實驗原理：
（1）特異性結合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞，通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。 
（2）活補體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。 
（3）結合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結合不同種的細胞，參與免疫應答。 
（4）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質，也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗體對理化因子的與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在 上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經透析法將其純化。
正癸醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))n-Decyl alcohol質量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)  小鼠ELISA試劑盒  素B2(TXB2)ELISA試劑盒 ，英文名： TXB2 ELISA Kit

琥珀(standard for GC,≥99.6%(GC))Diethyl succinate質量規(guī)格：standard for GC,≥99.6%(GC)  小鼠前動力蛋白2(PK2)ELISA試劑盒 ，英文名： PK2 ELISA Kit  MouseCompleme1inhibitoraoaibody,C1INHELISA試劑盒小鼠補體1抑制物抗體(C1INH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

癸二(Standard for GC, ≥99.5% (GC))Diethyl sebacate質量規(guī)格：Standard for GC, ≥99.5% (GC)  人維生素D2(VD2)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminD2,VD2ELISAKit 96T/48T  ELISAKitS-100小鼠S100蛋白規(guī)格：48T/96T

二十二烷(standard for GC,≥99.0%(GC))Docosane質量規(guī)格：standard for GC,≥99.0%(GC)  大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)試劑盒 Rat Iegrin αM,ITG/CD11b ELISA Kit  Chickeoxoplasmacirculatingaigen,TCAELISAKit雞弓形蟲循環(huán)抗原(TCA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
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RabbitUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAKit兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  535-83-1葫蘆巴堿   Trigonelline

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