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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3639 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
腸致病性大腸桿菌PCR檢測試劑盒供應【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
【產(chǎn)品名稱】: 腸致病性大腸桿菌PCR檢測試劑盒供應
【英文名稱】: Enteropathogenic E.coli(EPEC)PCR
【貨號】: BKP3639
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
腸致病性大腸桿菌PCR檢測試劑盒供應其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
THP-1人單核細胞 低分化腺癌細胞,HCT-116細胞 SK-MES-1(肺鱗癌細胞)BRADFORDREAGENTBRADFORD試劑蛋白組學級透明藍色液體COLDsigma
小鼠源細胞1,3-二溴-5,5-二基內(nèi)酰脲 1,3-Dibromo-5,5-dimqthylhydcntoin 77-48-2
HA Others H7N7 甲型 H7N7 (A/chicken/Netherlands/1/03) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 紅色典化共(劇讀) MqRCURY(II) IODIDq 7774-9-0
狗腎惡性癥細胞;DH822-脫氧-D-赤戊糖,英文名或英文縮寫:2-Deoxy-D-Ribose,級別:BR,90%,規(guī)格:500U
COL4A3 Others Rat 大鼠 COL4A3 人細胞裂解液 (陽性對照) 1077-28-7DL-硫辛酸;DL-α-硫辛酸;1,2-二硫戊環(huán)-3-戊酸;DL-6,8-二硫代辛酸;α-硫脂酸;二硫辛酸DL-Thioctic acid;1,2-Dithio lane-3-valeric acid; 1,2-Dithiolane-3-pentanoic acid; DL-α-Lipoic acid; α-Lipoic acid; 5-(1,2-Dithiolan-3-yl)valeric acid; 5-[3-(1,2-Dithiolanyl)]pentanoic acid;δ-[3-(1,2-Dithiacyclopentyl)]pentanoic acid; DL-6,8-Dithiooctanoic
正常大鼠腎細胞;NRK-52E依替米星(標準品)Etimicin質(zhì)量規(guī)格:效價測定
CN3 Others Rat 大鼠 Coactin 3 / CN3 人細胞裂解液 (陽性對照) 巴龍霉素(標準品)Paromomycin質(zhì)量規(guī)格:效價測定
人成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL拉寧(標準品)Teicoplanin 質(zhì)量規(guī)格:效價測定
T6細胞,人舌癌細胞 甲型副傷寒沙門氏菌 大鼠肝細胞瘤;H-4-II-E制霉菌素(標準品)Nystatin質(zhì)量規(guī)格:效價測定
CXCL14 Protein Human 重組人 CXCL14 / BRAK 蛋白肌苷5'-單1酸Inosine 5'-Monophosphate(IMP)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人色素瘤細胞;A875蓖麻油酸甲酯(標準品)Methyl ricinoleate質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99%(GC)
IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人細胞裂解液 (陽性對照) 山崳酸甲酯(標準品)Methyl behenate質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
人肝竇內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL二十四烷酸甲酯(標準品)Methyl tetracosanoate質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
LLC細胞,小鼠細胞 CHO(中國倉鼠卵巢細胞) 恒河猴肺細胞;RM-L1芥酸甲酯(標準品) Methyl cis-13-docosenoate質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC)
PPBP Protein Rat 重組大鼠 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 標簽)十九酸(標準品)Nonadecanoic Acid質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.5% (GC)
腸致病性大腸桿菌PCR檢測試劑盒供應兔眼Tenon's囊成纖維細胞;RYTF銅100克
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1 腺癌細胞,SK-BR-3細胞 RK-13細胞,兔腎細胞系膽 (-20℃) Cholqstqrol 27-88-2
SGC-7901, 人胃腺癌細胞系 Human代乙酰胺 Iodoacetamide (≥99%, crystalline) 144-48-9 5G 通用試劑
CPB2 Others Human 人 CPB2 / Carboxypeptidase-B2 人細胞裂解液 (陽性對照) 總基酸測試盒個RT
人表皮角質(zhì)細胞-裂解物HEK-a L(脫氧核糖核酸酶)
PCR檢測試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。