|
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BK-P64000 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | 詳見說明書% |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
|
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
|
沙門氏菌SPP-specPCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
50T |
BK-P64000 |
實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
小鼠樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 N,N'-Di-Boc-1H-pyrazole-1-carboxamidine 152120-54-2 中文名：N,N'-二叔丁氧羰基-1H-吡唑-1-甲脒 分子式：C14H22N4O4 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
小鼠樣生長因子2(IGF-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T Manidipine di 89226-75-5 中文名：鹽酸馬尼地平 分子式：C35H40Cl2N4O6
小鼠樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 N,N'-Di-Boc-1H-pyrazole-1-carboxamidine 152120-54-2 中文名：N,N'-二叔丁氧羰基-1H-吡唑-1-甲脒 分子式：C14H22N4O4
小鼠樣生長因子1(IGF-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T N,N'-Bis(2-hydroxyethyl)oxamide 中文名：N,N'-雙(2-羥乙基)草酰胺 分子式：C6H12N2O4 度：98.0%
小鼠受體β(ISR-β)ELISAKit ELISA.
96T/48T N6-Benzoyladenine 4005-49-6 中文名：N6-苯甲?；汆堰?span> 分子式：C12H9N5O
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞(彝族);HYLD-鹽酸伐昔洛韋D-Valacyclovir 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
大鼠肝細(xì)胞瘤;H4-II-E-C3 腺癌細(xì)胞，CW-2細(xì)胞 R1610細(xì)胞，中國倉鼠倉鼠肺細(xì)胞伐昔洛韋雜質(zhì)FValacyclovir Impurity F質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
BPH-1, 細(xì)胞 Human4,5-二氯熒光素(>98%,BR)4,5-Dichlorofluorescein質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
ICOSLG Others Human ICOSLG / B7-H2 / ICOSL / CD275 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 對乙氧基苯(>98%,BR)4-Ethoxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
滑膜細(xì)胞培養(yǎng)基SM4-羥基(>98%,BR)4-Hydroxycoumarin質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
大鼠肺平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL苔酚葡萄糖苷；地衣二醇葡萄糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Orcinol glucosid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%，標(biāo)準(zhǔn)品
C6/36細(xì)胞，蚊子細(xì)胞 A-704(細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A短葶山麥冬皂苷C（標(biāo)準(zhǔn)品）Liriope muscari baily saponins C質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD)百兩金素A（標(biāo)準(zhǔn)品）Ardisiacrispin A質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
L-O2(正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 角膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)柳穿魚黃素（標(biāo)準(zhǔn)品）Pectolinarigenin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
腎系膜細(xì)胞培養(yǎng)基MCM-prf瓜子金皂苷己（標(biāo)準(zhǔn)品）Polygalasaponin F質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
2-Amino-6-chlorobenzothiazole 中文名：2-氨基-6-氯苯并噻唑 分子式：C7H5ClN2S 內(nèi)皮細(xì)胞合酶 (eNOS) 作用：
ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
2-Amino-5-nitrothiazole 中文名：2-氨基-5-硝基噻唑 分子式：C3H3N3O2S 內(nèi)皮生長因子受體2 英文名稱： vascuiar endothelial growth factor receptor 2 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： VEGF-R2
2-Amino-5-nitrobenzophenone 中文名：2-氨基-5-硝基二苯甲酮 分子式：C13H10N2O3 內(nèi)皮生長因子受體3 英文名稱： vascuiar endothelial growth factor receptor 3 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： VEGF-R3
2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole 中文名：2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑 分子式：C2H3N3S2 活性腸肽 英文名稱： vasoactine inestinal peptide 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： VIP
2-Amino-5-chlorobenzophenone 中文名：2-氨基-5-氯二苯甲酮 分子式：C13H10ClNO 內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素 英文名稱： Visfatin 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： Visfatin
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative
real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
沙門氏菌SPP-specPCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
